В опыте наилучшую зимостойкость в условиях повышенной кислотности почвы показали растений клонов Т2 (115,6 % к стандарту и 123,5 % к исходной форме), 292 (123,0 % к стандарту и 108,5 % к исходной форме). Зимостойкость растений К7 (F1) в опыте составила 84 % по сравнению со стандартом (ВИК 7 — 78 %) и исходной формой (К — 83 %) (табл. 9). Наибольшей зимостойкостью на третий год жизни отличались растения клона 292 (в среднем 86 %) при 71,3 % у исходного образца Трио и 32 % у стандарта ВИК 7. Растения клевера лугового клона 23 (ВИК 7), характеризующиеся наименьшей кислотоустойчивостью в культуре in vitro, на третий год жизни в полевых условиях все погибли. Лучшие показатели по продуктивности зеленой массы в условиях повышенной кислотности почвы были у растений-регенерантов Т2 (273,4 %), 292 (180,3 % (Трио) и F1 К7 (Кретуновский) 198,0 % по отношению к исходным формам и 172,8; 113,9 и 125,0 % соответственно к стандарту. Продуктивность сухого вещества в среднем с одного растения в опыте была самой высокой у F1 К7 и составляла 334,2 % к исходной форме и 258,8 % к стандарту. Тогда как по отношению к контролю растения F1 К7 (38,2 %) значительно уступали Т2 (51,5 %) и 292 (65,8 %) (табл. 10). Растения R0 клонов Т2 ,292 характеризовались дружным цветением и были на неделю раннеспелее исходного сортообразца Трио и на две недели сорта ВИК 7. Последний также отличался большой растянутостью фазы цветения (от начала до полного цветения — 2 недели) и фазы созревания — 2,5 недели. По семенной продуктивности одного растения на почвах с повышенной кислотностью лучшие показатели были у Т2 (115,4 %), 292 (101,2 %) по отношению к стандарту (табл. 11). Остальные кислотоустойчивые клоны находились по этому показателю на уровне стандарта (F1 К7). Растения-регенеранты клевера лугового, прошедшие отбор в культуре in vitro на агаризованных средах с высоким содержанием ионов алюминия и показавшие высокую устойчивость к токсическим факторам кислых почв при оценке вегетационным методом и в полевых условиях, были расклонированы методом, подробно описанным нами ранее (Солодкая и др., 2002), и на их основе создана коллекция кислотоустойчивых форм. На Фаленской селекционной станции была проведена оценка более 2000 кислотоустойчивых растений-регенерантов клевера лугового, полученных методом культуры in vitro во ВНИИ кормов. Было установлено, что выделенные номера превышают по кислотоустойчивости исходные формы и стандарты по основным хозяйственно ценным признакам в условиях эдафического стресса. В опыте (почвы с рН 3,8–4,0 и обменного алюминия 10–12 мг/100 г воздушно-сухой почвы) на второй год жизни их зимостойкость составляла 115,6 % к стандарту и 123,5 % к исходной форме. При этом растения-регенеранты характеризовались дружным цветением и были на неделю раннеспелее исходных клонов и на 2 недели — стандарта. По семенной продуктивности они превышали стандарт в 1,4 раза. Растения-регенеранты отличались повышенным содержанием сырого протеина (20,2–20,8 %) при 18,6 % у стандарта. Существенные различия (на 39,8–98,9 %) выявлены также между кислотоустойчивыми клонами и их исходными образцами по урожайности зеленой массы (Покрышкина и др., 2001). Таким образом, растения-регенеранты клевера лугового, полученные методом селекции in vitro и показавшие высокую устойчивость на агаризованных селективных средах с 100 мг/л трехвалентного алюминия и рН 3,2 , в полевых условиях имели также высокую устойчивость к токсическим факторам почв с повышенной кислотностью (15 мг обменного алюминия на 100 г воздушно-сухой почвы, рН 4,5), т. е. разработанные селективные системы отбора и оценки in vitro кислотоустойчивых форм клевера лугового адекватно отражают воздействие токсических факторов почв с повышенной кислотностью на интактные растения клевера лугового in vivo. Созданный исходный материал включен в селекционный процесс Таким образом, во ВНИИ кормов им. В. Р. Вильямса успешно разработан ряд методов, позволяющих создавать на основе ценных сортообразцов клеточные системы клевера лугового с высокой способностью к регенерации. В зависимости от разработанных нами приемов эти системы могут характеризоваться высокой гетерогенностью и использоваться для скрининга ценных генотипов методами клеточной селекции. Для направленного изменения генотипов клевера лугового методами генетической трансформации разработан способ прямой регенерации растений, позволяющий сохранять все ценные селекционные признаки исходного образца и создавать генотипы, измененные по одному целевому признаку. Как в первом, так и во втором случаях, исходный генотип сохраняется, что обеспечивает, во-первых, контроль изменчивости, возникающей в процессе регенерации растений и, во-вторых, позволяет преодолеть высокую степень самостерильности и провести генетический анализ семенного потомства регенерантов клевера лугового.
|
Лаборатория молекулярно-генетических исследований кормовых культур Лаборатория физиологии сельскохозяйственных растений Взаимодействие: Приморский НИИСХ
|