|
|
Наиболее разработанным и широко используемым методом химического воздействия является обработка семян в растворах мутагенов. При этом в качестве растворителя наиболее часто используют дистиллированную воду, иногда с кислым буфером (фосфатный, ацетатный рН 5,6). Для снижения повреждающего действия корневой меристемы химическими мутагенами повышают рН раствора, применяют различные вещества, обладающие антимутагенным действием (гуанин, инозин, азид натрия). Иногда в качестве растворителя используют органические соединения (диметилсульфоксид, серный эфир). Необходимо учитывать, что разные химические мутагены неодинаково растворяются в воде. На частоту мутаций значительно влияет продолжительность обработки, которая в большой степени зависит от свойства семян или частей растений. Чем длительнее обработка, тем менее она эффективна, так как мутагены разлагаются в растворе и образуют токсичные вещества, что резко снижает всхожесть семян. Скорость размножения мутагена прямо пропорциональна температуре раствора и зависит от свойств мутагена. Оптимальная температура при обработке семян: + 20–25 ºС. У некоторых культур при продолжительном замачивании семян нарушается их целостность или же семена слипаются. В этом случае следует использовать растворы повышенных концентраций и воздействовать на семена в течение 2–6 часов. В экспериментальном мутагенезе успех работы определяется правильно выбранной дозой, которая в случае применения химических мутагенов складывается из концентрации и времени обработки (экспозиции). От дозы мутагена зависит не только количество, но и качество мутаций, которое меняется также от физиологических и морфологических особенностей, генетических особенностей, степени гетерогенности, числа и размера хромосом, возраста растений и других факторов. Неодинаковая мутабильность проявляется не только у разных культур, но и у разных сортов одной культуры. Наиболее резко сортовая специфичность проявляется у самоопыляющихся культур. Многолетние злаковые культуры отличаются средней чувствительностью к мутагенам. В начале работы с мутагенами необходимо установить оптимальные концентрации для изучаемых культур, используя показатели всхожести, выживаемости, морфологические изменения в М1, количество и качество выделенных мутационных форм в М2. Критерием предельных концентраций химических мутагенов по показателю выживаемости является летальная доза, при которой погибает 50 % организмов или клеток (ЛД-50).
|
Лаборатория молекулярно-генетических исследований кормовых культур Лаборатория физиологии сельскохозяйственных растений Взаимодействие: Приморский НИИСХ
|
