При скрещивании разнохромосомных видов идентификация проводится, в первую очередь, по числу хромосом в соматических клетках, которые, как правило, имеют промежуточное положение между родительскими формами, например, при скрещивании овсяницы луговой (2n = 14) и овсяницы тростниковой (2n = 42) гибриды имеют набор хромосом (2n = 28). Для определения подлинности гибридов используются также генетические маркеры-признаки, передаваемые по отцовской линии. Для увеличения выхода гибридов у злаковых трав используется метод эмбриокультуры, зародыши выделяются на 17–18-й день после оплодотворения из завязи в асептических условиях препаравальной иглой под микроскопом, помещаются в колбу на агаровую питательную среду. Колбы с зародышами в течение двух суток инкубируются в темноте, а затем — при освещении 3–5 тыс. люкс. Через 4–6 недель при образовании двух–трех настоящих листьев и нормально развитых корней растения высаживают в сосуды с почвой. В дальнейшем проводится идентификация гибридов, плодовитость и стабильность. Для повышения фертильности гибридов в качестве родительских форм лучше использовать индуцированные тетраплоиды или же переводить стерильные гибриды на тетраплоидный уровень. Во втором случае злаки клонируются на отдельные побеги, у которых отрезают корни, а под точкой роста делают отверстия. Затем побеги помещают на 24 часа в 0,2%-ный водный раствор колхицина с добавлением 2%-ного диметилсульфоксида и насыщением кислородом. Побеги тщательно проливают и высаживают в селекционный питомник. Из точек роста выделяются новые побеги, которые подвергаются цитологическому анализу для выявления амфидиплоидов. Гибриды 2n = 28, 2n = 42 отличаются высокой фертильностью, и отбор на обсемененность не вызывает больших сложностей. В последующих поколениях расщепление практически не наблюдается, можно формировать популяции с ценными хозяйственными признаками. У гибридов F2 и в последующих поколениях отмечают фазы развития, определяют продуктивность кормовой массы и семян, высоту растений, число стеблей, междоузлий, облиственность, массу 1000 семян, всхожесть семян, процент щуплых семян.
|
Лаборатория молекулярно-генетических исследований кормовых культур Взаимодействие:
|